LC3000液相色譜儀的流動相和樣品的使用情況
LC3000液相色譜儀是利用混合物各組分在固定相和流動相中溶解、分配或吸附等化學(xué)作用性能的差異,使各組分在作相對運(yùn)動的兩相中反復(fù)多次受到上述各作用力而達(dá)到相互分離。LC3000液相色譜儀在食品分析、環(huán)境分析、生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)檢驗和無機(jī)分析等領(lǐng)域得到廣泛使用。一般來說,80%~85%的有機(jī)物原則上可采用LC3000液相色譜儀分析。
LC3000液相色譜儀操作步驟:
1、開機(jī)設(shè)定參數(shù)(檢測波長、流速),更換所需流動相,檢查色譜柱是否正確。
2、排液置換管路中流動相,沖洗進(jìn)樣閥,洗好進(jìn)樣針。
3、沖洗色譜柱進(jìn)行平衡,其間可提前進(jìn)行樣品的處理,樣品信息的注冊。
4、平衡好以后進(jìn)空白試驗,排除系統(tǒng)污染。
5、柱子穩(wěn)定好以后進(jìn)樣,等待運(yùn)行結(jié)束(其間清洗進(jìn)樣針),積分計算,出具報告。
LC3000液相色譜儀的流動相:
1、流動相應(yīng)選用色譜純試劑、高純水或雙蒸水,酸堿液及緩沖液需經(jīng)過濾后使用,過濾時注意區(qū)分水系膜和油系膜的使用范圍;
2、水相流動相需經(jīng)常更換(一般不超過2天),防止長菌變質(zhì);
3、使用雙泵時,A、B、C、D四相中,若所用流動相中有含鹽流動相,則A、D(進(jìn)液口位于混合器下方)放置含鹽流動相,B、C(進(jìn)液口位于混合器上方)放置不含鹽流動相;
A、B、C、D四個儲液器中其中一個為棕色瓶,用于存放水相流動相。
LC3000液相色譜儀的樣品:
1、采用過濾或離心方法處理樣品,確保樣品中不含固體顆粒;
2、用流動相或比流動相弱(若為反相柱,則極性比流動相大;若為正相柱,則極性比流動相小)的溶劑制備樣品溶液,盡量用流動相制備樣品液;
手動進(jìn)樣時,進(jìn)樣量盡量小,使用定量管定量時,進(jìn)樣體積應(yīng)為定量管的3~5倍;
色譜柱:
1、使用前仔細(xì)閱讀色譜柱附帶的說明書,注意適用范圍,如pH值范圍、流動相類型等;
2、使用符合要求的流動相;
3、使用保護(hù)柱;
4、如所用流動相為含鹽流動相,反相色譜柱使用后,先用水或低濃度甲醇水(如5%甲醇水溶液),再用甲醇沖洗。
5、色譜柱在不使用時,應(yīng)用甲醇沖洗,取下后緊密封閉兩端保存;
6、不要高壓沖洗柱子;
7、不要在高溫下長時間使用硅膠鍵合相色譜柱;